[科普中國]-茶多酚棕櫚酸酯

茶多酚棕櫚酸酯是一種無毒的脂溶性食品抗氧化劑。

介紹茶多酚棕櫚酸酯(Tea Polyphenol Palmitate)。

目前油溶性的特丁基對苯二酚(TBHQ)、丁基羥基茴香醚(BHA)和二丁基羥基甲苯(BHT)在國家標(biāo)準(zhǔn)(GB2760-2014)范圍內(nèi)允許在油脂和含油脂的食品中使用。然而這類合成抗氧化劑有一定的毒性,在一些國家和地區(qū)使用已經(jīng)受到限制，BHT在美國禁止使用,BHA在日本限制使用,TBHQ在日本禁止使用。
隨著人們對食品安全的關(guān)注度提高,各種無毒的脂溶性食品抗氧化劑也相應(yīng)面世。2014年6月，國家衛(wèi)計委發(fā)布了增補茶多酚棕櫚酸酯等兩種食品添加劑的公告，現(xiàn)已被收錄進GB2760-2014。茶多酚棕櫚酸酯是一種安全無毒的食品抗氧化，而且具有很好的保健功能，茶多酚棕櫚酸酯單體-EGCG棕櫚酸酯已經(jīng)有很多這方面的報道。日本已經(jīng)有茶多酚棕櫚酸酯的產(chǎn)品在市場上銷售。

隨著食品工業(yè)進步，對健康抗氧化劑需求越來越高，各種新型抗氧化劑也應(yīng)運而生，例如迷迭香提取物(ROS)、茶多酚、茶多酚棕櫚酸酯、維生素E、抗壞血酸、抗壞血酸棕櫚酸酯(AP)、甘草抗氧化物、竹葉抗氧化物，如何篩選出抗氧化效果好的健康抗氧化劑顯得尤其重要。其中茶多酚棕櫚酸酯在2014年6月被國家衛(wèi)計委收錄進GB2760-2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》，是新型的油脂抗氧化劑。

用量及使用范圍

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質(zhì)量規(guī)格要求生產(chǎn)工藝以綠茶為原料提取的茶多酚經(jīng)過與棕櫚酰氯酯化，過濾、水洗、脫溶、結(jié)晶、離心、凍干、包裝等步驟加工生產(chǎn)的食品添加劑茶多酚棕櫚酸酯。

技術(shù)要求
感官要求:應(yīng)符合下表的規(guī)定。

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理化指標(biāo):應(yīng)符合下表的要求。

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檢驗方法A.1安全提示本標(biāo)準(zhǔn)試驗方法中使用的部分試劑具有毒性或腐蝕性，按相關(guān)規(guī)定操作，使用時需小心謹慎。若濺到皮膚上應(yīng)立即用水沖洗，嚴(yán)重者應(yīng)立即治療。在使用揮發(fā)性酸時，要在通風(fēng)廚中進行。

A.2一般規(guī)定本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑和水，在沒有注明其他要求時，均指分析純試劑和GB/T6682-2008規(guī)定的三級水。試驗中所用標(biāo)準(zhǔn)溶液、雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液、制劑及制品，在沒有注明其他要求時，均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的規(guī)定制備。試驗中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時，均指水溶液。

A.3鑒別試驗A.3.1試劑和材料A.3.1.1無水乙醇。

A.3.1.2硫酸。
A.3.1.3石油醚(沸點90C~120°C)。

A.3.1.4乙酸乙酯。

A.3.1.5香草醛。
A.3.1.6混合溶劑A:將石油醚與乙酸乙酯按體積比19:1混合均勻。
A.3.1.7香草醛顯色液:推確稱取1.0g的香草醛，溶解于100mL無水乙醇中，緩慢漓人20g硫酸，混勻并冷卻。

A.3.2茶多酚鑒別試驗
茶多酚棕澗酸酯是茶多酚的衍生物，在酸性條件下多酚類物質(zhì)能和香草醛進行特征性顯色反應(yīng)，可以通過顯色反應(yīng)進行鑒別。
精確稱取10.0mg茶多酚棕桐酸酯樣品，置于10mL試管中。向試管加入4mL無水乙醇，震蕩使其溶解。再向試管中加入2mL香草醛顯色液，震蕩搖勻，靜置Smin,顯紅色者為茶多酚棕桐酸酯或茶多酚。
A.3.3與水溶性茶多酚的鑒別試驗
茶多酚棕櫚酸酯和水溶性茶多酚在油脂或者其它低極性容劑中溶解度差別很大，可以利用它們的溶解度差異將其分離。
稱取20mg~30mg茶多酚樣品置于10mL.離心試管1中，再加人5mL.混合溶劑A,震蕩溶解，在4000rpm下商心5min。將離心后的上清液轉(zhuǎn)移到另一10mL離心試管2中。再移取5mL混合溶劑A加入到離心試管1中，在4000rpm離心5min。將離心后的上清液轉(zhuǎn)移到離心試管2,合并上清液。將離心沉淀溶于10mL無水乙醇，記為沉淀液。分別移取1mL上清液和1mL沉淀液到10mL試管中，各自加入4mL香草醛顯色液，混合搖勻，等待5min顯色。
觀察顯色結(jié)果，如果上清液呈紅色，說明樣品中含有茶多酚棕櫚酸脂;如果沉淀液顯紅色，說明樣品中含有茶多酚;如果二者都顯紅色，說明樣品是茶多酚棕櫚酸酯和茶多酚的混合物。如果二者都不顯色，說明樣品中既不含茶多酚，又不含茶多酚棕櫚酸酯。

A.4茶多酚棕櫚酸酯含量的測定A.4.1試劑和材料

A.4.1.1茶多酚棕櫚酸酯:經(jīng)45C真空干燥至位重后使用。

A.4.1.2維生素C:經(jīng)45C真空干燥至恒重后使用

A.4.1.3沒食子酸乙酯:樣品經(jīng)重結(jié)晶純化，高效液相色諧檢測純度99.9%。經(jīng)45C真空干燥至恒重后使用。

A.4.1.4維生素C溶液:0.075moVL,準(zhǔn)確稱取1,3222g維生素C,用水溶解后定容至100mL。

A.4.1.5三乙醇胺溶液:量取50.0mL三乙醇胺，加入25mL水稀釋后轉(zhuǎn)人100mL容量瓶中，并用水稀釋至刻度。
A.4.1.6沒食子酸乙酯標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液:準(zhǔn)確稱取0.1000g沒食子酸乙酯，用水溶解后定容至100mL。
A.4.1.7茶多酚棕櫚酸酯乙醇溶液:準(zhǔn)確稱取約500mg茶多酚棕櫚酸酯(精確至0.1mg),記為茶多酚棕櫚酸酯干重m,用無水乙醇溶解并定容至100mI。
A.4.1.8酒石酸亞鐵溶液:準(zhǔn)確稱取1.6050g硫酸業(yè)鐵(FeS04.7H20)和8.0440g酒石酸鉀鈉，分別用水溶解后轉(zhuǎn)入至1000mL容量瓶中，稀釋至刻度。
A.4.2分析步驟
A.4.2.1于25mL容量瓶中依次移入5ml酒石酸亞鐵溶液、1mL三乙醇胺溶液、2mL維生素C溶液，用水定容至刻度，充分播勻。此為空白溶液(1)。
A.4.2.2取5個25mL容量瓶分別依次加入5mL酒石酸亞鐵溶液、1mL三乙醇胺溶液、2mL維生素C溶液，然后用移液管分別移取0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL.的沒食子酸乙酯標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液加到容量瓶中，以水定容至刻度，充分搖勻。配制好的溶液在室溫下放置1h。以空白溶液(1)為參照，在520umn波長下測定該溶液的吸光度，以沒食子酸乙酯標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度對溶液吸光度建立沒食子酸乙酯標(biāo)準(zhǔn)曲線(標(biāo)準(zhǔn)曲線線性相關(guān)系數(shù)要求0.999以上)。
A.4.2.3于25mL容量瓶中依次移入5mL,酒石酸亞鐵溶液、1mL.三乙醇胺溶液、2mL維生素C溶液，移入1mL(記為體積v)的茶多酚棕櫚酸酯乙醇溶液(放液速度要慢),用少許無水乙醇吹洗瓶口的殘留液至容量瓶，以水定容至刻度，充分搖勻。配制好的溶液在室溫下放置1h,以空白溶液(1)為參照，在520nm波長下測定該溶液吸光度。所得吸光度在沒食子酸乙酯標(biāo)準(zhǔn)曲線上查到對應(yīng)的依度c(μg/mL),該濃度乘以換算系數(shù)3.5,即為測得的茶多酚棕櫚酸酯濃度。

A.4.3結(jié)果計算茶多酚棕櫚酸酶含量的質(zhì)量分數(shù)w，按公式計算:

w=(3.5 x100x25xcx100%)÷vxmx1000
式中:

3.5-茶多酚棕櫚酸酯相對于沒食子酸乙酯的換算系數(shù)(等質(zhì)量濃度沒食子酸乙酯和茶多酚棕櫚酸酯吸光值的比值);
c-測得的茶多酚棕櫚酸酯-亞鐵的吸光度在沒食子酸乙酯標(biāo)準(zhǔn)曲線上查到的對應(yīng)濃度(ug/mL);
v-從100mL容量瓶移入到25mL容量瓶中的茶多酚棕桐酸酯乙醇溶液的體積(mL)(見A4.2.3);
m-茶多酚棕櫚酸酯干重(mg);
100-茶多酚棕櫚酸酯乙醇溶液的定容體積(mL)(A.4.1.7);

25一A.4.2.3的定容體積(mL);
1000-將茶多酗棕櫚酸酯的千重從mg換算成μg的換算系數(shù)。

A.5溶解度的測定稱取25.0g茶多酚棕櫚酸酯樣品，倒入250mL燒杯中，加入100g的植物油，攪拌條件下加熱到90~110°C，使其充分溶解(攪拌過程中，溶液表面伴有適量泡沫，屬正?，F(xiàn)象)，然后冷卻至室溫觀察溶解性。如果植物油澄清，則茶多酚棕櫚酸酯的溶解度為≥25g/100g;如果植物油中有明顯的不溶物，則茶多酚棕櫚酸酶的溶解度為