[科普中國]-諾森RNA吸印技術(shù)

吸印雜交技術(shù)的應(yīng)用，逐步從DNA擴(kuò)展到包括RNA和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移雜交在內(nèi)的更加廣泛的研究領(lǐng)域。但由于RNA分子不能同硝酸纖維素濾膜結(jié)合，所以索森技術(shù)不能直接地應(yīng)用于RNA的吸引轉(zhuǎn)移。1979年阿爾溫發(fā)現(xiàn)，將電泳凝膠中的RNA轉(zhuǎn)移到疊氮化的或其他化學(xué)修飾的活性濾紙上，通過共價交聯(lián)作用可永久地結(jié)合在一起。

簡介吸印雜交技術(shù)的應(yīng)用，逐步從DNA擴(kuò)展到包括RNA和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移雜交在內(nèi)的更加廣泛的研究領(lǐng)域。但由于RNA分子不能同硝酸纖維素濾膜結(jié)合，所以索森技術(shù)不能直接地應(yīng)用于RNA的吸引轉(zhuǎn)移。1

發(fā)展1979年阿爾溫發(fā)現(xiàn)，將電泳凝膠中的RNA轉(zhuǎn)移到疊氮化的或其他化學(xué)修飾的活性濾紙上，通過共價交聯(lián)作用可永久地結(jié)合在一起。這種方法同索森的DNA吸印技術(shù)十分類似，所以稱諾森RNA吸印技術(shù)。1

特點(diǎn)RNA分子同活性濾紙共價結(jié)合得十分牢固，但可以通過在雜種核酸分子呈不穩(wěn)定狀態(tài)的溫度條件下漂洗雜交濾紙的辦法，洗脫上次雜交反應(yīng)中同RNA分子同源結(jié)合的放射性探針分子。因此，這一類吸印轉(zhuǎn)移的濾紙可以多次反復(fù)使用。活性濾紙不僅能同RNA分子牢固地結(jié)合，而且能相當(dāng)有效地結(jié)合變性的DNA分子。事實(shí)上疊氮化的活性濾紙，比硝酸纖維素濾膜能更有效地轉(zhuǎn)移并結(jié)合小片段DNA，最近還發(fā)現(xiàn)，在適當(dāng)條件下，硝酸纖維素濾膜能直接吸印RNA。1

本詞條內(nèi)容貢獻(xiàn)者為:

胡芳碧 - 副教授 - 西南大學(xué)