[科普中國]-抗血栓肽

發(fā)展歷史

Jolles發(fā)現(xiàn)來源于一酪蛋白的殘基的有抑制血液凝固及抗血栓形成的作用，但經(jīng)胰蛋白酶水解后生成的小肽活性降低，不能抑制血纖維原的結(jié)合。同時(shí)發(fā)現(xiàn)牛乳k-酪蛋白與人纖維蛋白原γ-鏈具有結(jié)構(gòu)同源性，血纖維蛋白原上的結(jié)合位點(diǎn)能抑制血小板的凝集及血纖維蛋白原結(jié)合到活化的血小板上，并能抑制人血纖維蛋白原γ-鏈與血小板表面特異位點(diǎn)的結(jié)合，所以具有抗血栓形成的生理功能，且比人乳中纖維蛋白原的γ-鏈C末端的十二肽具有更強(qiáng)的抑制活性1。

動(dòng)物蛋白來源的抗血栓肽乳蛋白源目前，食物蛋白源具有抗血栓特性的活性肽主要來自牛k一酪蛋白的酶解物。牛k一酪蛋白來源的f106～116、f106～112和f113～116能夠抑制ADP活化的血小板聚集和人纖維蛋白原γ-鏈與血小板表面特異受體區(qū)域結(jié)合，這些肽的抗人血小板聚集作用強(qiáng)于血纖維蛋白原γ-鏈C端十二肽。f103～111能夠通過抑制血小板聚集而阻止血液凝固，但不影響纖維蛋白源與ADP活化的血小板結(jié)合。胰蛋白酶水解f106～116為更短的片段后活性減弱。然而，胰蛋白酶水解f106～116產(chǎn)生的最小活性片段是五肽f112～116，f112～116對(duì)ADP活化的血小板聚集和人纖維蛋白原γ-鏈與血小板表面特異受體區(qū)域結(jié)合的抑制作用，分別是f106～116和f113～116的30多倍和200多倍。

來自多種動(dòng)物的k-酪蛋白糖肽也是抗血栓肽的來源。來自羊k-酪蛋白的k-酪蛋白糖肽f106～171能夠劑量依賴性地降低凝血酶和膠原質(zhì)誘導(dǎo)的血小板聚集。胰蛋白酶水解羊k-酪蛋白糖肽可釋放出3種短肽Lys—Asp—Gln—Asp—Lys(f112～116)、Thr—Ala—Gln—Val—Thr—Ser—Thr—Glu—Val(f163～171)和Gln—Val—Thr—Ser—Thr—Glu—Val(f165～171)，這3種肽均能夠完全抑制凝血酶誘導(dǎo)的血小板聚集。f163～171和f165～171位于羊K-酪蛋白糖肽的C端，但未在牛k-酪蛋白糖肽中鑒定出具有類似功能的相應(yīng)的肽片段。除f106～116外，大部分抗血栓肽的活性是在體外檢測(cè)的，但這并不意味著在體內(nèi)也有活性2。

膠原蛋白源魚類蛋白 Niranjan等采用7種不同的蛋白酶對(duì)黃鰭金槍魚蛋白進(jìn)行酶解，然后從酶解產(chǎn)物中分離得到了1種特異性的魚蛋白，它具有抗凝血和抗血小板聚集的作用。此蛋白是一條單一肽鏈，它通過形成一種對(duì)Zn2+調(diào)節(jié)無活性的復(fù)合物來抑制活性凝結(jié)因子Ⅻ(FⅫa)，其被稱為黃鰭金槍魚抗凝血蛋白。

雞蛋蛋白 蛋清蛋白的Alcalase和Protease N酶解物均具有抗凝血酶活性，在相同水解度條件下，兩種酶水解蛋清蛋白所得酶解物的肽分子量分布類似，但由于兩種酶的酶切肽鍵位點(diǎn)不同，產(chǎn)生了不同氨基酸序列的肽段，因此，即使肽的分子量分布相似，酶解物的抗凝血酶活性仍存在差別，這也說明是酶解蛋清蛋白產(chǎn)生的肽而不是游離氨基酸或完整蛋白質(zhì)對(duì)凝血酶發(fā)揮抑制作用。

植物蛋白來源的抗血栓肽目前已經(jīng)從大豆中分離純化出了兩種肽，即Asp—Glu—Glu 和 Ser—Ser—Gly—Glu，它們是血小板凝積的抑制劑，由外肽酶 278 和 279 的系列酶解產(chǎn)生。納豆的水解產(chǎn)物在腎臟膜中也具有明顯的抗血栓作用。利用堿性蛋白酶水解菜籽蛋白得到的酶解物在 30 ~ 40 mg /ml 濃度下能夠顯著抑制凝血酶催化的血纖維蛋白原凝固， 抑制率可達(dá) 90% 以上3。

應(yīng)用盡管體外實(shí)驗(yàn)證明k-酪蛋白和乳鐵蛋白來源的抗血栓肽具有抗血栓形成作用，但這些抗血栓肽是否能在乳品消化過程中被釋放出來并吸收進(jìn)入血液循環(huán)目前還不清楚。如果這些抗血栓肽能夠在體內(nèi)影響血小板功能，那么乳品飲食有可能產(chǎn)生重要的抗血栓形成作用。

人纖維蛋白原a鏈來源肽 Arg—G1y—Asp—Ser的抗血栓作用已有大量研究報(bào)道。然而，由于Arg—Gly—Asp—ser可引起內(nèi)皮細(xì)胞脫落，因此，靜脈注射Arg—G1y—Asp—Ser產(chǎn)生的毒性作用引起了極大關(guān)注。來自乳鐵蛋白的抗血栓肽Lys—Arg—Asp—ser不具Arg—G1y—Asp—Ser的有害作用，且其作用機(jī)制和(或)結(jié)合位點(diǎn)可能不同于Arg—Gly—Asp—ser。因此，盡管纖維蛋白原和乳蛋白具有序列同源性，但相對(duì)于纖維蛋白原來源的抗血栓肽，乳蛋白來源的抗血栓肽具有新型抗血栓形成功能?；谌榈鞍自纯寡牡囊陨咸匦?，這些抗血栓肽可作為食品添加劑用于功能食品，并可作為藥物先導(dǎo)物用于新抗血栓藥物的設(shè)計(jì)2。