1911 年,阿喇果發(fā)現(xiàn),當(dāng)線偏振光通過某些透明物質(zhì)時,它的振動面將會繞光的傳播方向轉(zhuǎn)過一定的角度,這種現(xiàn)象就叫旋光效應(yīng),光的振動面轉(zhuǎn)過的角度稱為旋光度,又稱旋光率。使光的振動面產(chǎn)生旋轉(zhuǎn)的物質(zhì)叫做旋光物質(zhì)(進(jìn)一步地,迎著光的傳播方向看,使光的振動面順時針轉(zhuǎn)動的物質(zhì)叫右旋物質(zhì),反之則為左旋物質(zhì))。常見的旋光物質(zhì)有:石英、朱砂、酒石酸、食糖溶液、松節(jié)油等。旋光儀是測定旋光物質(zhì)旋光度的儀器,通過對旋光度的測定可確定物質(zhì)的濃度、純度、比重、含量等,可供一般的成分分析之用,廣泛應(yīng)用于石油、化工、制藥、香料、制糖及食品、釀造等工業(yè)。
基本概念旋光率,又稱旋光度,當(dāng)平面偏振光通過含有某些光學(xué)活性的化合物液體或溶液時,能引起旋光現(xiàn)象,使偏振光的平面向左或向右旋轉(zhuǎn)(按順時針方向轉(zhuǎn)動稱為右旋,用“+”表示;按逆時針方向轉(zhuǎn)動稱為左旋,用“-”表示)1。
物體具有旋光性的條件物體具有旋光性,其結(jié)構(gòu)不能具有空間反演不變的性質(zhì)。對于分子可以隨機(jī)朝向的多晶或者溶液,分子必須具有手征性。由于有機(jī)分子本身的手征性導(dǎo)致的旋光性稱為內(nèi)旋光,內(nèi)旋光分為左旋光和右旋光性,但如果一種物體內(nèi)部同時具有左右旋光或物體分子本身結(jié)構(gòu)具有相反的手性,則物體不表現(xiàn)旋光性。由于物體內(nèi)部同時具有左右旋光的分子而不表現(xiàn)旋光性稱為外消旋性,而分子本身結(jié)構(gòu)具有相反的手性而不表現(xiàn)旋光性稱為內(nèi)消旋性2。
旋光率的測定手性化合物的旋光度可用旋光儀來測定。旋光儀結(jié)構(gòu)如圖所示。其基本原理為從鈉光源發(fā)出的光,通過一個固定的Nikol棱鏡-起偏鏡變成平面偏振光。平面偏振光通過裝有旋光物質(zhì)的盛液管時,偏振光的振動平面會向左或向右旋轉(zhuǎn)一定的角度。只有將檢偏棱鏡向左或向右旋轉(zhuǎn)同樣的角度才能使偏振光通過到達(dá)目鏡。向左或向右旋轉(zhuǎn)的角度可以從旋光儀刻度盤上讀出,即為該物質(zhì)的旋光度3。
下面以葡萄糖溶液的旋光度測定為例說明旋光度的測試步驟:
1.待測溶液的配制:準(zhǔn)確量取0.50g/mL的葡萄糖和果糖樣品10.00mL,定容在100mL容量瓶中配成溶液。
2.旋光儀的零點(diǎn)校正:旋光儀接通電源,鈉光燈發(fā)光穩(wěn)定后(約5min),將裝滿蒸餾水的測定管放人旋光儀中,校正目鏡的焦距,使視野清晰。旋轉(zhuǎn)手輪,調(diào)整檢偏鏡刻度盤,使視場中三分視場的明暗程度一致,讀取刻度盤上所示的刻度值。反復(fù)操作兩次,取其平均值作為零點(diǎn)(零點(diǎn)偏差值)。
3.裝待測液:洗凈測定管后,用少量待測液潤洗2-3次,注入待測液,并使管口液面呈凸面。將護(hù)片玻璃沿管口邊緣平推蓋好(以免使管內(nèi)留存氣泡),裝上橡皮填圈,擰緊螺帽至不漏水(太緊會使玻片產(chǎn)生應(yīng)力,影響測量)。用軟布擦凈測定管,備用(如有氣泡,應(yīng)趕至管頸突出處)。
4.旋光度的測定:換放盛有待測樣品的測試管,按上述方法測其旋光度值,重復(fù)兩次,取其平均值,由葡萄糖溶液的比旋光度計算濃度。
實(shí)驗(yàn)完畢,洗凈測定管,再用蒸餾水洗凈,擦干存放。注意鏡片應(yīng)用軟絨布揩擦,勿用手觸摸。
注意事項(xiàng):
1、旋光管中不能有氣泡。
2、旋光管管蓋只要旋至不漏水即可。過緊了,旋鈕會造成損壞,或因玻片受力而致使有一定的假旋光。
3、實(shí)驗(yàn)完畢后,用蒸餾水洗凈旋光管,并擦干外壁,以防止金屬部件被腐蝕4。
本詞條內(nèi)容貢獻(xiàn)者為:
蒲富永 - 教授 - 西南大學(xué)