利用物質(zhì)的旋光性質(zhì)測定溶液濃度的方法。許多物質(zhì)具有旋光性(又稱光學(xué)活性),如含有手征性碳原子的有機(jī)化合物。當(dāng)平面偏振光通過這些物質(zhì)(液體或溶液)時,偏振光的振動平面向左或向右旋轉(zhuǎn),這種現(xiàn)象稱為旋光。偏振光旋轉(zhuǎn)的角度稱為旋光度,旋轉(zhuǎn)的方向與時針轉(zhuǎn)動方向相同時稱為右旋,以“+”號表示;如與之相反,則稱為左旋,以“-”號表示。
原理旋光性質(zhì)為化合物的特性,可以用于鑒別和定量測定。為便于比較,通常將旋光度換算成比旋光度(又稱旋光率),其定義為在一定溫度下,一定波長的偏振光透過每毫升中含有1克旋光性物質(zhì)的溶液1分米長時所旋轉(zhuǎn)的角度。
儀器測定旋光的儀器稱為旋光計,它由單色光源、偏光鏡、測量管、分析鏡和檢測裝置所組成。由光源發(fā)出的單色光經(jīng)過偏光鏡(常用尼科爾棱鏡)產(chǎn)生面偏振光,然后通過測量管,照到分析鏡上。分析鏡為另一偏光鏡,可在軸心方向轉(zhuǎn)動。當(dāng)測量管內(nèi)不含樣品時,通過分析鏡的光強度由偏光鏡與分析鏡偏振面的交角而定。交角為零度時則全部通過,而當(dāng)二者成90°角時,則無光線通過,在分析鏡上的檢測裝置視野中將為全暗。此時,如果在測量管中裝上光學(xué)活性物質(zhì)的溶液時,由于偏振光被旋轉(zhuǎn),從測量管透過的光與分析鏡偏振面的交角不再為90°,因此有部分光線通過,在檢測器視野中將看到光亮。將分析鏡旋轉(zhuǎn),又可使視野中變?yōu)槿?此時偏振光與分析鏡的偏振面又為直角相交。分析鏡旋轉(zhuǎn)的角度可由刻度盤上讀出,此讀數(shù)即樣品的旋光度。為了便于觀察,儀器中常裝有半蔭器,將視野分為兩個半圓,測量時將分析鏡調(diào)節(jié)至兩個半圓內(nèi)的光亮度相等時作為終點。新式的儀器則使用光電管或其他裝置,將光強度轉(zhuǎn)為電信號后測量,或自動顯示出旋光度讀數(shù),消除了人為的誤差,提高了準(zhǔn)確度。
影響比旋光度的因素1、濃度:大多數(shù)光學(xué)活性物質(zhì)的比旋光度都或多或少地受濃度的影響;
2、溶劑:溶劑對比旋光度的影響差別很大,和溶劑分子與溶質(zhì)分子之間的作用有關(guān)。因此在報道比旋光度時,均需注明所用的溶劑和濃度,如“c=1,CHCl3”表明系在氯仿中配成1%濃度的溶液進(jìn)行測量的。
3、溫度:進(jìn)行測量時應(yīng)保持在恒定溫度并標(biāo)明之。
4、波長:比旋光度與波長的關(guān)系用德魯?shù)路匠瘫硎?。測量時必須固定波長,常用鈉光譜的D線(589.3納米),有時也用汞的綠線(546.1納米)。以比旋光度或旋光度對波長作圖,稱為旋光譜,英文縮寫為ORD。
應(yīng)用旋光法可用于各種光學(xué)活性物質(zhì)的定量測定或純度檢驗。將樣品在指定的溶劑中配成一定濃度的溶液,由測得的旋光度算出比旋光度,與標(biāo)準(zhǔn)比較,或以不同濃度溶液制出標(biāo)準(zhǔn)曲線,求出含量。在旋光計的基礎(chǔ)上還發(fā)展了一種糖量計,專門用于測量蔗糖含量。用白光為光源,以石英楔抵消蔗糖溶液對不同波長光的色散,并將石英楔校正,標(biāo)以蔗糖的百分含量,即可直接測出濃度,簡便迅速,常用于制糖工業(yè)。
本詞條內(nèi)容貢獻(xiàn)者為:
方正 - 副教授 - 江南大學(xué)