[科普中國]-細胞毒性T淋巴細胞

細胞毒性T淋巴細胞（CTL），是白細胞的亞部，為一種特異T細胞，專門分泌各種細胞因子參與免疫作用。對某些病毒、腫瘤細胞等抗原物質(zhì)具有殺傷作用，與自然殺傷細胞構(gòu)成機體抗病毒、抗腫瘤免疫的重要防線。

細胞毒性T淋細胞又稱殺傷性T淋巴細胞，是機體抗腫瘤機制的重要環(huán)節(jié)，也是腫瘤免疫過繼療法主要效應(yīng)細胞之一。

細胞毒性T淋巴細胞的分類與特征CTL是以克隆為單位的不均質(zhì)的細胞群，根據(jù)其細胞表面標志（表面抗原和表面受體）可分為3類：

1、細胞毒或殺傷性T細胞（Tc）：其表面抗原為CD3+，CD4+，CD8+，TCR有a和β兩條多肽鏈組成。

2、細胞毒性T輔助細胞（CTh）：其細胞表面標志為CD3+，CD4+，CD8+，TCRaβ，它是原來的T輔助細胞，近來發(fā)現(xiàn)其在有些情況也表現(xiàn)細胞毒效應(yīng)的功能，故新命名細胞毒性T輔助細胞。它主要通過識別特異性抗原和I類MHC分子的腫瘤細胞，并殺傷這些腫瘤細胞，在防止一些淋巴系統(tǒng)的腫瘤及殺傷某些抗原調(diào)變的腫瘤細胞變異株可能有一定的意義。

3、新一類的殺傷性T細胞：它的細胞表面標志為CD3+，CD4-，CD8-，TCRn或CD3+，CD4+，CD8+，TCRn細胞，是近年來發(fā)現(xiàn)的一種新的殺傷性T細胞。其特點是具有了γ和β鏈組成T細胞抗原變體，而且所介導(dǎo)的殺傷細胞效應(yīng)是MHC非限制性的。1

細胞毒性T淋巴細胞的作用機理殺傷靶細胞的過程CTL殺傷靶細胞是一個連續(xù)過程，可分為三個階段，主要研究內(nèi)容如下：

1、效應(yīng)靶細胞結(jié)合：CTL是通過其膜上的受體TCR，即Ti-CD3分子與靶細胞結(jié)合，此時膜上的淋巴細胞功能相關(guān)抗原I與靶細胞膜上的配基I，又稱細胞內(nèi)粘附分子相互作用，即靶細胞與效應(yīng)細胞初步接觸。此時親和力低，為非特異性的，但可促使TCR識別抗原分子，一旦識別抗原CD3分子傳導(dǎo)信號，可通過β鏈磷酸化從而導(dǎo)致LFA-1的激活，被激活的LFA-1介導(dǎo)CTL與靶細胞結(jié)合。

2、第二信使的激活與信息傳導(dǎo)：CTL與靶細胞結(jié)合的信息可導(dǎo)致CTL膜中與鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白相關(guān)的磷脂酶C的活化，此酶水解膜組分PIP2（磷脂酰肌醇二磷酸），所得產(chǎn)物IP3（肌醇三磷酸）與DG（二酯酰甘油）都可被看作第二信使，IP3與DG又激發(fā)兩個互相聯(lián)系又互相獨立的分子反應(yīng)，

3、Ca離子釋放與蛋白激酶的活化：IP3能使Ca2+儲存網(wǎng)迅速釋放Ca2+造成胞液中Ca2+上升，游離Ca2+能活化鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶使蛋白磷酸化，后者可激發(fā)核內(nèi)DNA復(fù)制；DG與游離Ca2+反應(yīng)激活胞漿中的重要介質(zhì)PKC（蛋白激酶C），PKC使胞漿內(nèi)顆粒中的蛋白質(zhì)分子磷酸化，使膜上的LFA-1的β鏈磷酸化，磷酸化的LFA-1又與細胞骨架相互作用從而引導(dǎo)細胞顆粒遷移到與靶細胞相結(jié)合的部位，釋放各種溶細胞介質(zhì)，從而促使靶細胞溶解和死亡1。

靶細胞的溶解與死亡原因主要是靶細胞膜損傷后所致的細胞破裂和DNA斷裂引起的核崩解促使靶細胞死亡，至此過程CTL可產(chǎn)生多種細胞毒介質(zhì)殺傷祝細胞，這些介質(zhì)包括：穿孔素、絲氨酸酯醇、干擾素和腫瘤壞死因子，這4種介質(zhì)中，穿孔露的殺傷機制是當殺傷細胞粘著在配細胞膜上，前者胞質(zhì)含有的穿孔素顆粒在高濃度Ca2+存在下被降解，釋放穿孔素單位進入細胞間隙，通過聚合作用在靶細胞膜上形成跨膜通道，導(dǎo)致膠體滲透破壞細胞，但一般認為，在人體中不依賴Ca2+的非穿孔素殺傷及旁殺傷作用（如腫瘤壞死因子樣殺傷等）可能是機體殺傷靶細胞的基本途徑。而IL-2誘導(dǎo)的依賴Ca2+的穿孔素樣殺傷作用則可能是應(yīng)激狀態(tài)下的輔助途徑1。

細胞毒性T淋巴細胞試驗該試驗測定被特定抗原攻擊后抗原特異性CD8+T淋巴細胞的裂解或者引起的炎癥反應(yīng)。用細胞毒性T淋巴細胞（CTL）測試細胞介導(dǎo)免疫需要成功的抗原呈遞，以及隨之產(chǎn)生的細胞因子、細胞接觸依賴的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)來產(chǎn)生記憶T淋巴細胞，這是T細胞應(yīng)答的基礎(chǔ)。CTL試驗曾用于小鼠和大鼠，也用于大型動物模型，但標準的臨床前評價試驗?zāi)Ｐ瓦€沒有建立。

較好的用于CTL試驗的抗原是活的流感病毒。將選擇的病毒通過鼻內(nèi)感染的方式感染成年動物。用已知數(shù)目的病毒隔夜培養(yǎng)MCH1靶細胞，或者在用51Cr標記前的預(yù)定時間培養(yǎng)。在感染以及病毒復(fù)制之后（通常數(shù)日至1周），收集脾、肺、淋巴結(jié)和骨髓，制備單細胞懸液。將來自淋巴組織的效應(yīng)細胞與同一配比或不同配比的MHC1靶細胞共培養(yǎng)，計數(shù)每一配比中自溶細胞的比例，與對照組進行比較。

分析方法為比較試驗組和對照組的自溶指數(shù)。自溶指數(shù)減少提示免疫抑制2。

本詞條內(nèi)容貢獻者為:

江松敏 - 副教授 - 復(fù)旦大學(xué)