[科普中國]-菌落

菌落，是指由單個微生物細胞在適宜固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長繁殖到一定程度，形成以母細胞為中心的一團肉眼可見的、有一定形態(tài)、構(gòu)造等特征的子細胞集團。

通常是細菌在固體培養(yǎng)基上（內(nèi)）生長發(fā)育，形成以母細胞為中心的一團肉眼可見的、有一定形態(tài)、構(gòu)造等特征的子細胞的集團，稱之為菌落。

簡介菌落，亦稱集落。一定種的單個菌體或孢子在一定的固體培養(yǎng)基上生長繁殖后形成的肉眼可見的微生物聚集體。1

在培養(yǎng)基表面生長的菌落，叫表面菌落；在表面下生長的菌落，叫埋藏或深層菌落。不同的微生物形成的菌落有不同的特征，是鑒定菌種的重要標志。

各種微生物在一定條件下形成的菌落特征，如大小、形狀、邊緣、表面、質(zhì)地、顏色等，具有一定的穩(wěn)定性，是衡量菌種純度、辨認和鑒定菌種的重要依據(jù)。菌落特征與微生物的菌體形態(tài)結(jié)構(gòu)特征密切相關(guān)。例如，細菌、酵母菌不形成菌絲，其菌落僅生長在固體培養(yǎng)基表面，與培養(yǎng)基結(jié)合不緊密，可用接種工具將其全部挑起；而放線菌、霉菌的菌體大多分化為營養(yǎng)菌絲與繁殖菌絲，營養(yǎng)菌絲深入培養(yǎng)基中吸取營養(yǎng)，具有與培養(yǎng)基結(jié)合較緊，不易挑起等特征。

形態(tài)特征菌落形態(tài)包括菌落的大小、形狀、邊緣、光澤、質(zhì)地、顏色和透明程度等。每一種細菌在一定條件下形成固定的菌落特征。不同種或同種在不同的培養(yǎng)條件下，菌落特征是不同的。這些特征對菌種識別、鑒定有一定意義。

細胞形態(tài)是菌落形態(tài)的基礎(chǔ)，菌落形態(tài)是細胞形態(tài)在群體集聚時的反映。細菌是原核微生物，故形成的菌落也?。患毦鷤€體之間充滿著水分，所以整個菌落顯得濕潤，易被接種環(huán)挑起；球菌形成隆起的菌落；有鞭毛細菌常形成邊緣不規(guī)則的菌落；具有莢膜的菌落表面較透明，邊緣光滑整齊；有芽孢的菌落表面干燥皺褶；有些能產(chǎn)生色素的細菌菌落還顯出鮮艷的顏色。2

大腸桿菌在普通瓊脂培養(yǎng)基上面都是一樣的,圓形邊緣整齊，表面光滑，半透明，小凸起；典型的大腸桿菌在伊紅美藍瓊脂平板上的特征為：深紫黑色、光滑、濕潤、帶有金屬光澤的圓形菌落。

培養(yǎng)操作方法根據(jù)標準要求或?qū)ξ廴厩闆r的估計，選擇2~3個適宜稀釋度，分別在制10倍遞增稀釋的同時，以吸取該稀釋度的吸管移取1ml稀釋液于滅菌平皿中，每個稀釋度做兩個平皿。將涼至46℃營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基注入平皿約15ml，并轉(zhuǎn)動平皿，混合均勻。同時將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1ml稀釋液（不含樣品）的滅菌平皿內(nèi)作空白對照。待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置36±1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)48±2h，取出計算平板內(nèi)菌落數(shù)目，乘以稀釋倍數(shù)，即得每克（每毫升）樣品所含菌落總數(shù)。3

操作要點1．傾注用培養(yǎng)基應在46℃水浴內(nèi)保溫，溫度過高會影響細菌生長，過低瓊脂易于凝因而不能與菌液充分混勻。如無水浴，應以皮膚感受較熱而不燙為宜。傾注培養(yǎng)基的量規(guī)定不一，從12~20ml不等，一般以15ml較為適宜，平板過厚可影響觀察，太薄又易于干裂。傾注時，培基底部如有沉淀物，應將底部棄去，以免與菌落混淆而影響計數(shù)觀察。

2．為使菌落能在平板上均勻分布，檢液加入平皿后，應盡快傾注培養(yǎng)基并旋轉(zhuǎn)混勻，可正反兩個方向旋轉(zhuǎn)，檢樣從開始稀釋到傾注最后一個平皿所用時間不宜超過20min，以防止細菌有所死亡或繁殖。

3．培養(yǎng)溫度一般為37℃（水產(chǎn)品的培養(yǎng)溫度，由于其生活環(huán)境水溫較低，故多采用30℃）。培養(yǎng)時間一般為48h，有些方法只要求24h的培養(yǎng)即可計數(shù)。培養(yǎng)箱應保持一定的濕度，瓊脂平板培養(yǎng)48h后，培養(yǎng)基失重不應超過15%。

4．為避免食品中的微小顆?；蚺嗷械碾s質(zhì)與細菌菌落發(fā)生混淆，不易分辨，可同時作一稀釋液與瓊脂培基混合的平板，不經(jīng)培養(yǎng)，而于4℃環(huán)境中放置，以便計數(shù)時作對照觀察。在某些場合，為了防止食品顆粒與菌落混淆不清，可在營養(yǎng)瓊脂中加入氯化三苯四氮唑（TTC），培養(yǎng)后菌落呈紅色，易于分別。

注意事項1. 操作要快而準，包括材料、加樣、倒培養(yǎng)基。

2. 吸液體時液體不能進入吸頭。

3. 樣品稀釋時一定要混勻。

4. 倒培養(yǎng)基前，瓶口要過火焰。

5. 一定要有空白對照。

6. 培養(yǎng)基溫度控制，培養(yǎng)基薄厚。

7. 檢測時一定要使平皿完全暴露于空氣中。

本詞條內(nèi)容貢獻者為:

趙磊 - 副教授 - 中國農(nóng)業(yè)大學